血細(xì)胞分析常見干擾因素及處理方式

血細(xì)胞分析儀是臨床檢驗(yàn)最常用的儀器之一。血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用，不但提高了工作效率和質(zhì)量，而且為臨床提供了更多具有臨床價(jià)值的參數(shù)，對(duì)疾病的診斷治療有著重要的意義?，F(xiàn)在廣泛應(yīng)用臨床的電阻抗法血細(xì)胞分析儀在細(xì)胞檢測(cè)的過程中仍存在某些局限性，在實(shí)際工作中常常會(huì)受到一些異常因素的干擾。在此主要討論血細(xì)胞分析過程中標(biāo)本自身的干擾因素及糾正措施，以確保我們檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。常見的干擾因素如下。

1.受干擾常見因素

1.1冷凝標(biāo)本：冷凝集素病是免疫球蛋白M(IgM)抗體引起的自身免疫病。其特點(diǎn)是在較低的溫度下，某些疾病患者自身的紅細(xì)胞與這種抗體發(fā)生凝集。血液冷凝集對(duì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及其各項(xiàng)參數(shù)的檢測(cè)都能造成很大影響。研究表明，冷凝集素可以導(dǎo)致WBC、MCV假性增高，RBC、HCT、PLT假性減低，特別是RBC、HCT降低尤為顯著，但RBC、HB、HCT 3個(gè)參數(shù)結(jié)果之間的關(guān)系明顯不符，并由此造成MCH、MCHC等計(jì)算結(jié)果異常增高[1]。糾正措施：將標(biāo)本放入37℃水浴箱30min ，立即上機(jī)檢測(cè)，各個(gè)參數(shù)基本恢復(fù)正常。

1.2脂血標(biāo)本：脂血是最常見的干擾因素。由于血紅蛋白檢測(cè)原理是比色法，引起血清濁度增大的因素（如高脂血癥、異常血漿蛋白質(zhì)、WBC>50*109/L等）都可導(dǎo)致其假性增高，進(jìn)而引起MCH、MCHC顯著增加。處理方法：緩慢離心，吸取血漿加入等量的稀釋液。

1.3免疫球蛋白的干擾：巨球蛋白血癥和多發(fā)性骨髓瘤時(shí)血漿中IgM 增高，高濃度的免疫球蛋白干擾了溶血?jiǎng)┑淖饔?，引起MCHC假性增高。解決辦法：稀釋樣本或吸取血漿加入等量的稀釋液。

1.4溶血標(biāo)本：正常血清中游離血漿血紅蛋白正常參考范圍為：10-40mg/L，與紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白一起檢測(cè)時(shí)，不會(huì)引起紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白增高。但在病理情況下，某些傷害（如毒蛇咬傷后）誘發(fā)的彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）、藥物、輸血或采血不順利等因素可引起標(biāo)本溶血，血漿游離血紅蛋白增加，可使MCHC假性增高，RBC明顯減少。糾正措施：觀察血涂片是否有較多RBC碎片，或與臨床聯(lián)系，重新采集標(biāo)本。

２.WBC常受的干擾因素

2.1有核RBC：由于正常情況下RBC的數(shù)量約是WBC的1000倍，會(huì)引起白細(xì)胞總數(shù)和淋巴細(xì)胞總數(shù)及其比例顯著假性增高[2]。特別在某些疾病如溶血性貧血時(shí)，外周血中可出現(xiàn)大量有核RBC，它不能被稀釋液破壞，而使WBC計(jì)數(shù)偏高。部分五分類血細(xì)胞分析儀會(huì)提示有核RBC存在，部分五分類儀器（邁瑞B(yǎng)C-6800/6900等）也會(huì)計(jì)數(shù)有核ＲＢＣ并自動(dòng)校正而直接給出準(zhǔn)確的WBC計(jì)數(shù)結(jié)果[3]。糾正措施：手工分類計(jì)數(shù)100個(gè)WBC遇到的有核RBC數(shù)，依據(jù)WBC校正公式進(jìn)行計(jì)算

2.2巨大PLT標(biāo)本：某些血液系統(tǒng)疾病患者血液中可能出現(xiàn)與WBC大小相同的巨大PLT，這些巨大PLT被當(dāng)作WBC計(jì)數(shù)，使WBC假性增高。糾正措施：用手工方法對(duì)WBC進(jìn)行計(jì)數(shù)。

2.3難溶血或溶血不良標(biāo)本：嚴(yán)重肝病患者由于RBC膜抗溶性增強(qiáng)。糾正方法：采用手工方法計(jì)數(shù)WBC；用某些不受干擾的儀器檢測(cè)，排除干擾。

2.4高濃度膽紅素：高濃度膽紅素影響WBC的計(jì)數(shù)和分群。在游離膽紅素為192.1μmol/L時(shí)，對(duì)ＷＢＣ的計(jì)數(shù)和分群影響很小，256.1μmol/L時(shí)影響顯著，384.1μmol/L時(shí)對(duì)ＷＢＣ的計(jì)數(shù)影響顯著，儀器無法分群[4]。糾正方法：采用手工方法計(jì)數(shù)WBC。

３.PＬT常受的干擾因素

3.1小細(xì)胞性貧血標(biāo)本：缺鐵性貧血、地中海貧血等患者的小細(xì)胞對(duì)某些儀器ＰＬＴ的計(jì)數(shù)有明顯干擾。一般電阻抗法血液分析儀將30-36fL的顆?；虻?0fl（部分光學(xué)法儀器）的顆粒設(shè)置為PLT。電阻抗法血細(xì)胞分析儀，僅能識(shí)別顆粒大小，不能區(qū)分顆粒性質(zhì)。當(dāng)MCV＜70fl時(shí)，血細(xì)胞分析儀的PLT計(jì)數(shù)容易受小細(xì)胞的干擾而假性增高。一些高檔血細(xì)胞分析儀可以抗小紅細(xì)胞的干擾。主要是這些儀器采用了光學(xué)法的流式細(xì)胞學(xué)計(jì)數(shù)原理檢測(cè)ＰＬＴ糾正措施：用微鏡重新計(jì)數(shù)PLT或者采用光學(xué)法流式血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血小板。

3.2   PLT聚集：①采血不順利時(shí)引起血小板破壞和聚集，可使血小板計(jì)數(shù)假性降低。措施：重新采集血液或者手工方法計(jì)數(shù)PLT。②EDTA-K2抗凝，PLT形態(tài)逐漸變?yōu)榍蛐?，體積增大，且可引起PLT聚集。造成血分析儀不能辨認(rèn)，引起PLT假性減少。措施：用不含EDTA抗凝劑稀釋液立即稀釋標(biāo)本或顯微鏡重新計(jì)數(shù)PLT，同時(shí)要觀察血涂片是否有PLT集聚。

3.3PLT衛(wèi)星現(xiàn)象：由EDTA抗凝劑誘導(dǎo)引起的PLT圍繞在中性粒細(xì)胞或淋巴細(xì)胞／淋巴瘤細(xì)胞周圍，形成衛(wèi)星現(xiàn)象。一般引起PLT中度減少。克服辦法：立即稀釋標(biāo)本檢測(cè)。

3.4細(xì)胞碎片：血細(xì)胞分析儀不能完全將PLT與其他類似大小物質(zhì)，如紅細(xì)胞碎片或白細(xì)胞碎片、灰塵等區(qū)別，引起PLT假性增高。糾正方法：用顯微鏡手工計(jì)數(shù)PLT。

4.其他

微生物包括細(xì)菌、真菌、瘧原蟲等也會(huì)干擾WBC、PLT檢測(cè)。

腦電圖機(jī)廠家綜上所述，由于某些疾病的原因，造成血液標(biāo)本性質(zhì)的改變。血液分析儀在血細(xì)胞檢測(cè)的過程中，常受標(biāo)本自身的干擾因素是不可忽視的。這就要求檢驗(yàn)人員要從中找到正確的解決辦法，力求結(jié)果準(zhǔn)確，為臨床提供一個(gè)可靠的診斷依據(jù)。